超濾離心管選擇的過(guò)程中需要注意哪些問(wèn)題
更新時(shí)間:2022-05-17 點(diǎn)擊次數(shù):1139次
超濾離心管在進(jìn)行超濾和離心時(shí)的注意事項(xiàng):
在操作過(guò)程中需避免長(zhǎng)時(shí)間或高速離心。我們的產(chǎn)品雖然已采用防死角設(shè)計(jì),但也要注意避免過(guò)度離心造成的膜表面干燥從而造成不可逆吸附,并且要避免過(guò)度濃縮。最終體積越小,越容易因表面吸附而損失得率。離心后,可輕輕吹吸過(guò)濾膜截留的溶液數(shù)次,必要時(shí)補(bǔ)加入一定體積的緩沖液沖洗膜表面,有利于減少膜表面的吸附,提高回收率,盡量避免 TIPS 接觸膜表面。
超濾離心管選擇的過(guò)程中需要注意哪些問(wèn)題:
1、選擇合適的截留分子量,通常是靶標(biāo)1/3大小的截留分子量適合。但有時(shí)則需要更小的孔徑來(lái)滿(mǎn)足回收率的要求。如果在病毒和核酸樣品,可參看下面截留分子量和病毒顆粒分子大小以及核酸大小的換算表。
2、考慮樣品和分子特性:比如改變pH 可能增加構(gòu)象改變的風(fēng)險(xiǎn),而降低溫度可能降低濃縮效率等。
3、使用合適的裝置處理方法:例如預(yù)沖洗以去除分析物或用非干擾蛋白沖洗以鈍化結(jié)合位點(diǎn)并減少損失。
4、選擇合適的裝置:賽多利斯擁有適用于低濃度樣品、DNA、蛋白質(zhì)、病毒、過(guò)濾應(yīng)用等廣泛的裝置選項(xiàng);選擇合適的裝置可以有效改善結(jié)果。
5、選擇正確的膜:超濾沒(méi)有太多的膜選項(xiàng),但您應(yīng)對(duì)再生纖維素(RC)、聚醚砜(PES)材料進(jìn)行測(cè)試,以確定哪種材料可為您的特定材料提供低的非特異性結(jié)合和*的回收率。
6、考慮樣品控制方法,例如使用裝置內(nèi)的“死體積”移走所有截留物,或預(yù)灌裝濾液管以控制截留物的最終體積。